Osnovni uvod
Lizat eritrocita je jedna od najjednostavnijih i najlakših metoda za uklanjanje crvenih krvnih zrnaca, odnosno cijepanje crvenih krvnih stanica lizatom, koji ne oštećuje stanice s jezgrom i može u potpunosti ukloniti crvena krvna zrnca. Cepanje lizata je blaga metoda uklanjanja crvenih krvnih zrnaca, koja se uglavnom koristi za odvajanje i pročišćavanje ćelija tkiva raspršenih enzimskom probavom, odvajanje i pročišćavanje limfocita, te uklanjanje crvenih krvnih zrnaca u eksperimentima s proteinima i nukleinskim tkivima. ekstrakcija kiseline. Ćelije tkiva dobivene lizatom crvenih krvnih stanica ne sadrže crvena krvna zrnca i mogu se dalje koristiti za primarnu kulturu, fuziju stanica, protočnu citometriju, odvajanje i ekstrakciju nukleinske kiseline i proteina itd.
Uputstvo za upotrebu
Uzorak ćelije tkiva
1. Svježa tkiva su digestirana pomoću pankreasa/enzima ili kolagenaze i dispergirana u jednoćelijsku suspenziju, a supernatant je odbačen centrifugiranjem.
2. Uzmite ELS lizat iz frižidera na 4, dodajte ELS lizat ćelijskom talogu u omjeru 1:3-5 (dodajte 3-5ml lizata na 1ml zbijene ćelije), lagano uduvajte i promiješajte.
3. Centrifugirajte na 800-1000 o/min 5-8 minuta i bacite gornju crvenu bistru tečnost.
4. Precipitirani dio je sakupljen i centrifugiran sa Hankovim rastvorom ili rastvorom kulture bez seruma 2-3 puta.
5, ako pucanje nije potpuno/potpuno može se ponoviti koraci 2 i 3.
6. Resuspendiranje ćelija za naknadne eksperimente; Ako se RNK ekstrahuje, najbolje je to učiniti u otopini pripremljenoj iz koraka 4 koristeći DEPC vodu
Crvena krvna zrnca imaju vrlo kratak životni ciklus, samo 120 dana, ali se vrlo brzo razmnožavaju krv, a u ovom slučaju su posebno sposobna za diobu stanica i one su ćelije koje se najbrže dijele od svih, tako da je ova stanica vrlo vrijedna, tako da je veoma koristan za ćelijsku kulturu. Vrlo je jednostavan, nema nikakve organele u sebi, samo ćelijske membrane i proteine.