Dom > Blog > Industry News

Koje su funkcije ELISA kompleta?

2022-12-23

ELISA komplet se zasniva na čvrstoj fazi antigena ili antitela i enzimskom obeležavanju antigena ili antitela. Antigen ili antitijelo vezano za površinu čvrstog nosača i dalje zadržava svoju imunološku aktivnost, a enzimski obilježeni antigen ili antitijelo zadržava i svoju imunološku aktivnost i aktivnost enzima. U trenutku određivanja, uzorak koji se testira (u kojem se mjeri antitelo ili antigen) reaguje sa antigenom ili antitelom na površini čvrstog nosača. Kompleks antigen-antitelo formiran na čvrstom nosaču se odvaja od drugih supstanci u tečnosti ispiranjem.

Dodaju se enzimski označeni antigeni ili antitela, koja se takođe vezuju za čvrsti nosač reakcijom. U ovom trenutku, količina enzima u čvrstoj fazi je proporcionalna količini supstance u uzorku. Nakon dodavanja supstrata enzimske reakcije, enzim katalizira supstrat da postane obojeni proizvodi. Količina proizvoda je u direktnoj vezi sa količinom ispitivane supstance u uzorku, tako da se može izvršiti kvalitativna ili kvantitativna analiza prema dubini boje.

Visoka katalitička efikasnost enzima indirektno pojačava rezultate imunološkog odgovora, čineći test visoko osjetljivim. ELISA se može koristiti za određivanje antigena, ali se može koristiti i za određivanje antitijela.

Osnovni principi ELISA kompleta
Koristi specifičnu reakciju antigena i antitijela za povezivanje objekta sa enzimom, a zatim proizvodi reakciju boje između enzima i supstrata za kvantitativno određivanje. Predmet mjerenja može biti antitijelo ili antigen.

Za ovu metodu određivanja potrebna su tri reagensa:
â  Antigen ili antitijelo u čvrstoj fazi (imuni adsorbent)
â¡ Enzimski obilježeni antigen ili antitijelo (marker)
⢠supstrat za djelovanje enzima (sredstvo za razvoj boje)

U mjerenju se antigen (antitijelo) prvo vezuje za čvrsti nosač, ali i dalje zadržava svoju imunološku aktivnost, a zatim se dodaje konjugat (marker) antitijela (antigena) i enzima koji i dalje zadržava svoju prvobitnu imunološku aktivnost i enzim aktivnost. Kada konjugat reaguje sa antigenom (antitelom) na čvrstom nosaču, dodaje se odgovarajući supstrat enzima. Odnosno, katalitička hidroliza ili REDOX reakcija i boja.

Nijansa boje koju proizvodi proporcionalna je količini antigena (antitijela) koja se mjeri. Ovaj obojeni proizvod se može posmatrati golim okom, optičkim mikroskopom, elektronskim mikroskopom, takođe se može meriti spektrofotometrom (instrument za označavanje enzima). Metoda je jednostavna, praktična, brza i specifična.

X
We use cookies to offer you a better browsing experience, analyze site traffic and personalize content. By using this site, you agree to our use of cookies. Privacy Policy
Reject Accept