"Kao što svi znamo, PCR je osnovna eksperimentalna metoda u biohemijskim laboratorijama." Eksperimentalni rezultati su uvijek nezadovoljavajući, što može biti posljedica blage kontaminacije PCR plastičnog potrošnog materijala ili eksperimentalnih smetnji uzrokovanih uvođenjem inhibitora. Postoji još jedan vrlo važan razlog: nepravilan odabir potrošnog materijala također će imati veliki utjecaj na eksperimentalne rezultate.
Postoji mnogo razloga koji utiču na rezultate PCR eksperimenata: obično postoji sledećih 7 vrsta.
1. Prajmeri: Prajmeri su ključ za specifičnu reakciju PCR-a, a specifičnost PCR proizvoda zavisi od stepena komplementarnosti između prajmera i šablonske DNK;
2. Enzim i njegova koncentracija;
3. Kvalitet i koncentracija dNTP;
4. Template (ciljni gen) nukleinska kiselina;
5. Koncentracija Mg2+;
6. Podešavanje temperature i vremena;
7. Broj ciklusa;
8. Oprema, potrošni materijal, itd.
Među mnogim faktorima koji utiču, potrošni materijal je jedan od veoma važnih faktora koji se lako previde.
Postoji mnogo vrsta
PCR potrošni materijal: 8-epruvete, epruvete male zapremine, standardne epruvete, bez obruba, polu-obložene, pune i niz PCR i qPCR ploča. Veoma je teško izabrati, a postoji mnogo uobičajenih problema, pogledajmo probleme koje svako bira
PCR potrošni materijal, i kako ih riješiti?
Zašto su
PCR potrošni materijaluglavnom napravljen od PP?
Odgovor: PCR/qPCR potrošni materijal je uglavnom napravljen od polipropilena (PP), jer je to biološki inertan materijal, površina nije lako prianjati na biomolekule i ima dobru hemijsku otpornost i temperaturnu toleranciju (može se autoklavirati na 121 stepen) bakterije i može izdržati temperaturne promjene tokom termičkog ciklusa). Ovi materijali su obično u direktnom kontaktu sa reagensima ili uzorcima, tako da je potrebno odabrati visokokvalitetne materijale i dobre tehnike obrade tokom procesa proizvodnje i pripreme.